科研-Strombine脫氫酶(SDH)活性測定試劑盒

產品品牌：睿信生物 商品貨號：RXWB0485-96

文獻($TCount)

說明書
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反應種屬 /
檢測范圍 方法學：微板法
物理性能 液體組分應澄清，無沉淀或絮狀物；所有組分應無包裝破損。
用途 用于定量檢測生物樣本（如血清、血漿、尿液等）中特定生化指標�；谔囟ǖ纳磻恚軌驕蚀_、快速地測定樣本中各種生化物質的含量。
實驗原理 若需獲取詳細內容及操作程序，敬請下載產品說明書查閱。
特異性 若需獲取詳細內容及操作程序，敬請下載產品說明書查閱。
重復性 /
回收率 /
試驗所需自備試驗器材 /
操作程序 若需獲取詳細內容及操作程序，敬請下載產品說明書查閱。
注意事項 1.僅供科學研究使用。若不慎濺到人體表面如皮膚、眼睛等，必須用清水沖洗，如果誤食則需要到醫(yī)院治療。
2.使用時應做好防護措施并遵循所有實驗室試劑操作的注意事項。所有廢棄物應按當?shù)胤ㄒ?guī)要求處理。
4.使用前請仔細閱讀說明書。
問題分析 ①問題描述：標準曲線差
可能原因及相應對策：
1.試劑盒平衡時間不夠——不低于 2 個小時的室溫平衡
2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌
3.移液不精確——檢查和校正移液器
②問題描述：精密度低
可能原因及相應對策：
1.洗滌不充分——按說明書要求充分洗滌和浸泡
2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑
3.重復利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模
4.加樣不精確——檢查和校正移液器
③問題描述：O.D值低
可能原因及相應對策：
1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器，精確加入試劑
2.溫育時間不正確——保證充足的溫育時間
3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度
4.酶標記物或底物失效——通過混合酶標記物和底物，顏色迅速顯現(xiàn)來檢查
5.沒有加入終止液——按照說明書實驗操作步驟加入終止液
6.超出讀數(shù)時間讀數(shù)——在說明書推薦的讀數(shù)時間內讀數(shù)
④問題描述：樣本值
可能原因及相應對策：
1.不正確的樣本儲存方式——正確儲存樣本，使用新鮮樣本進行實驗
2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法
4.待測物質在樣本中含量低——使用新鮮樣本，重復實驗
聲明 該試劑盒僅供研究使用，如將其用于臨床診斷或任何其他用途，我公司將不對因此產生的問題負責，亦不承擔任何法律責任。

 ELISA試劑盒常見問題與解析

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）作為實驗室的“金牌檢測員”，在疾病診斷、生物標志物檢測、藥物研發(fā)等領域大顯身手。但再成熟的技術，也可能因為一個小細節(jié)“鬧脾氣”——標準曲線擬合不佳、信號忽高忽低、背景噪音干擾……別擔心！睿信生物憑借多年ELISA研發(fā)經驗，幫你揪出問題根源，讓實驗數(shù)據穩(wěn)穩(wěn)當當！

一、ELISA實驗常見問題大盤點

1. 標準曲線“翻車”——擬合度差、線性不佳

問題表現(xiàn)：標準曲線的R²值低于0.99，甚至出現(xiàn)“S”形或雜亂無章的趨勢。
可能原因：

標準品稀釋錯誤（梯度沒做好或混勻不充分）。

標準品反復凍融導致降解。

酶標板洗滌不徹底，孔間殘留液體影響吸光度。
解決方案：

標準品現(xiàn)配現(xiàn)用，避免多次凍融，稀釋時嚴格按說明書操作。

確保洗滌步驟規(guī)范，洗板機噴嘴無堵塞，手工洗板時甩干并拍干。

如果曲線仍不理想，嘗試更換標準品或檢查酶標儀波長是否準確。

 

2. 信號值太低——目標蛋白“隱身”了？

問題表現(xiàn)：樣本OD值接近空白孔，無法有效檢測目標蛋白。
可能原因：

樣本中目標蛋白濃度過低（低于檢測下限）。

抗體失效或孵育時間/溫度不足。

樣本處理不當（如反復凍融、未加蛋白酶抑制劑）。
解決方案：濃縮樣本（超濾離心）或換用高靈敏度ELISA試劑盒。

檢查抗體有效期，確保孵育時間充足（可適當延長）。

新鮮樣本優(yōu)先，避免反復凍融，必要時添加保護劑。

3. 背景信號高——全是“噪音”怎么辦？

問題表現(xiàn)：空白孔或陰性對照OD值偏高，影響結果判讀。
可能原因：

封閉不充分（封閉液選擇不當或時間不足）。

抗體交叉反應或非特異性結合。

洗滌不徹底，殘留試劑導致假陽性。
解決方案：

優(yōu)化封閉條件（常用BSA或脫脂奶粉，封閉時間可延長至1-2小時）。

增加洗滌次數(shù)（如從3次增至5次），確保每孔洗滌液加滿。

更換特異性更高的抗體，或調整一抗/二抗稀釋比例。

4. 重復性差——同一樣本結果忽高忽低

問題表現(xiàn)：同一批樣本檢測，孔間差異大，CV值超過20%。
可能原因：

加樣操作不一致（手法、速度差異）。

酶標板邊緣效應（邊緣孔蒸發(fā)快，溫濕度不均）。

試劑未平衡至室溫直接使用。
解決方案：

使用多通道移液器，統(tǒng)一加樣速度和角度。

孵育時覆蓋板蓋，避免邊緣孔干燥，可棄用邊緣孔作空白。

所有試劑使用前室溫平衡30分鐘，避免溫度差異影響反應效率。

二、ELISA實驗小貼士：細節(jié)決定成敗

1.樣本處理：血清/血漿避免溶血，細胞裂解液需離心去除碎片，組織樣本勻漿充分。

1. 

2.試劑保存：抗體、酶結合物等按說明書要求保存（-20℃分裝避免反復凍融）。

3.儀器校準：定期檢查移液器準確性，酶標儀做波長和光路校準。

4.對照設置：每板必設空白孔、陰性對照和陽性對照，監(jiān)控系統(tǒng)誤差。

三、遇到問題別慌！ELISA排查流程圖

如果實驗結果異常，可以按以下步驟快速排查：

檢查試劑：是否過期？是否正確保存？

 

回顧操作：孵育時間、溫度、洗滌步驟是否規(guī)范？

 

分析數(shù)據：標準曲線是否正常？對照是否符合預期？

 

重復實驗：換新試劑或調整條件后重試。

ELISA雖然操作簡單，但“細節(jié)魔鬼”常常藏在加樣、洗滌、孵育這些基礎步驟里。遇到問題時，耐心對照說明書、排查關鍵環(huán)節(jié)，往往能事半功倍。如果反復失敗，不妨聯(lián)系試劑盒技術支持——畢竟，好的實驗結果=靠譜的試劑+規(guī)范的操作+一點點的運氣！

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