科研 大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89)檢測試劑盒

      產(chǎn)品品牌:睿信生物 商品貨號:RX2D2022266

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      • 產(chǎn)品售價: 2800 2000
      • 產(chǎn)品規(guī)格: 96T 48T
      • 產(chǎn)品貨期:現(xiàn)貨
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      反應(yīng)種屬 大鼠
      檢測范圍 31.25pg/mL-1000pg/mL
      物理性能 試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝,無破損漏氣。
      用途 定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等樣本中大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89)的濃度。
      實驗原理 本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預包被抗大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89)抗體(固相抗體)的微孔酶標板中,加入大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89)校準品和待測樣本,再加入另一株 HRP 標記的抗大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89)抗體(酶標抗體),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標儀 450nm波長上測定吸光度(OD 值),吸光度(OD 值)與待測樣品中大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89)的濃度正相關(guān)。擬合校準品曲線,可以計算出樣本中大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89)的濃度。
      特異性 本試劑盒識別天然和重組大鼠免疫球蛋白A-Fc段受體Ⅰ(FcaRⅠ;CD89),與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
      重復性 板內(nèi)變異系數(shù)均<10%,板間變異系數(shù)均<15%。
      回收率 回收率在 85%-115%之間。
      試驗所需自備試驗器材 1、酶標儀(450nm)
      2、精密移液器及一次性吸頭
      3、蒸餾水
      4、洗瓶或者自動洗板機
      5、37℃水浴鍋或恒溫箱
      6、500ml 量筒
      操作程序 所有試劑和組分都先恢復到室溫,標準品、質(zhì)控品和樣品,建議做復孔。
      1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
      2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
      3、設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
      4、除空白孔外,標準品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL。
      5、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光孵育 60min。
      6、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復 5 次。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡 30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
      7、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光孵育 15min。
      8、所有孔加入終止液 50μL,在酶標儀 450nm 波長上讀取各孔吸光度(OD 值)。
      注意事項 1:如果試劑盒的組份需要再次使用,請確保上一次使用之后沒有被污染。
      2:酶標板單次未使用完,要謹記密封放到 2-8℃保存。
      問題分析 ①問題描述:標準曲線差
      可能原因及相應(yīng)對策:
      1.試劑盒平衡時間不夠——不低于 2 個小時的室溫平衡
      2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌
      3.移液不精確——檢查和校正移液器
      ②問題描述:精密度低
      可能原因及相應(yīng)對策:
      1.洗滌不充分——按說明書要求充分洗滌和浸泡
      2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑
      3.重復利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模
      4.加樣不精確——檢查和校正移液器
      ③問題描述:O.D值低
      可能原因及相應(yīng)對策:
      1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器,精確加入試劑
      2.溫育時間不正確——保證充足的溫育時間
      3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度
      4.酶標記物或底物失效——通過混合酶標記物和底物,顏色迅速顯現(xiàn)來檢查
      5.沒有加入終止液——按照說明書實驗操作步驟加入終止液
      6.超出讀數(shù)時間讀數(shù)——在說明書推薦的讀數(shù)時間內(nèi)讀數(shù)
      ④問題描述:樣本值
      可能原因及相應(yīng)對策:
      1.不正確的樣本儲存方式——正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗
      2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法
      3.待測物質(zhì)在樣本中含量低——使用新鮮樣本,重復實驗
      聲明 該試劑盒僅供研究使用,如將其用于臨床診斷或任何其他用途,我公司將不對因此產(chǎn)生的問題負責,亦不承擔任何法律責任。

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