elisa試劑盒和生化試劑盒該如何選擇和評判【人elisa試劑盒】

發(fā)布時間：2021/6/15 8:33:36      閱讀次數(shù)：2399

 隨著電子檢驗儀器的研制和普遍使用,推動了科研診斷試劑研究和使用廣泛化的進程,商品試劑與標準液按檢測項目組合成一套放在一個包裝盒內(nèi)叫試劑盒（reagent kit）,或叫試劑組合（reagent set）.

與自動化分析儀或者酶標儀匹配的試劑盒的研制和供應走向產(chǎn)業(yè)化的道路,它無疑是科研檢驗發(fā)展史上一個巨大的技術進步.但是,試劑盒的質(zhì)量,將嚴重影響測定結果的正確性.為了增強識別試劑質(zhì)量的能力,提高拒用劣質(zhì)試劑的自覺性,掌握有關試劑盒的質(zhì)量標準和質(zhì)量評價是有益的.

我們先來說說和自動生化分析儀想匹配的生化分析試劑盒的相關情況.此類試劑種類繁多,有液體型 粉劑型 片劑型,有單一試劑 雙試劑 干試劑 多試劑等.

一 液體型試劑和粉（片）劑型試劑

（一）液體型試劑

無論是單試劑還是雙試劑型試劑,目前乃至今后仍以液體型為主要劑型.其優(yōu)點是液體型試劑的試劑組分高度均一,瓶間差異小,測定重復性好和使用方便;它也無需加入任何輔助試劑及蒸餾水,避免了外源性水質(zhì)對試劑的影響,性能較穩(wěn)定,測定結果較為準確.缺點是液體型試劑（尤其是酶試劑）保存時間較短,不便于運輸.

1.液體單試劑

所謂液體單試劑就是將某種生化檢驗項目所用到的試劑科學地混合在一起,組成為一種試劑.應用時,只須將標本和試劑按一定比例混合,即可進行相應的生化反應,然后用適當?shù)姆椒z測結果.應用十分方便.為了簡化測定操作程序,提高工作效率,一度大多數(shù)試劑廠家都有單試劑,以滿足用戶的需要.如測定葡萄糖和膽固醇的酶法試劑等.這些試劑的廣泛使用,充分顯示出酶法試劑無毒性 操作簡便快速 測定結果可靠等優(yōu)點.但對有些生化檢驗項目來說,單試劑存在抗干擾能力差的缺點,給測定結果帶來相當大的分析誤差.例如,甘油三酯測定的一步法試劑,由于未消除樣品中的游離甘油,使測定結果中包括了內(nèi)源性甘油（平均約為 0.11mmol/L）,會給甘油三酯的測定值帶來較大的誤差.類似的情況還見于維生素C和尿酸及膽紅素對Trinder+選用時值得注意.

2.液體雙試劑

所謂液體雙試劑就是將某些生化檢測項目所用到的試劑,按用途科學地分成兩類,分別配成兩種試劑,通常試劑加入后可起到全部或部分消除某些內(nèi)源性干擾的作用,第二試劑為啟動被檢測物質(zhì)反應的試劑,兩種試劑混合后才共同完成被檢項目的生化反應.然后用適當?shù)姆椒z測結果.雙試劑型試劑盒,它保持了單試劑的優(yōu)點,增強了抗干擾能力和試劑的穩(wěn)定性,提高了測定的準確性,代表了診斷試劑盒劑型研制的主要發(fā)展方向.

（二）粉（片）劑型試劑

所謂粉劑型及片劑型試劑,即是將試劑的各組分用球磨技術粉碎成粉劑或混合后壓成片劑,使用前再加入指定的溶液復溶成液體試劑.干粉試劑如果在凍干分裝前是液體型的,則其各組分是相當均勻的;但如果用固體原料研磨后制成粉劑或片劑,則存在許多問題:

①要使試劑各組分混合得非常均勻,技術難度很大;

②分裝過程中的稱量誤差及復溶時加水量的準確性影響試劑的瓶間差;

③水質(zhì)優(yōu)劣對試劑的穩(wěn)定性和測定的可靠性有相當大的影響.

二 其它類型試劑

為了適應生化分析儀和測定方法學的進步,近年來研究了許多新型的試劑盒,主要有以下幾種.

（一）快速反應試劑盒

快速反應試劑盒主要是為了適應生化分析的技術進步,縮短反應時間,提高工作效率.如血液葡萄糖快速測定試劑盒.其試劑成分及濃度為磷酸鹽緩沖液 100mmol/ L,pH7.4±0.1,葡萄糖氧化酶 > 40u / ml,變旋酶 > 0.2u / ml,過氧化物酶 > 2.5u / ml,4-氨基安替比林 0.5 mmol/ L,4-羥基苯甲酸 4 mmol/L,亞鐵qing化鉀 1mg / L,疊氮鈉 0.4g / L.同一般葡萄糖氧化酶法試劑相比是明顯增加了葡萄糖氧化酶及過氧化物酶用量,更主要是增加了變旋酶,可使反應加快,3~4分鐘后即生成終顏色.再如快速膽固醇試劑盒,用的是 pH6.6±0.2,250mmol/ L 磷酸鹽緩沖液,膽固醇酯酶為 250u / L,膽固醇氧化酶 250 u/L,過氧化物酶 4000u / L,4-氨基安替比林 0.3mg /

L,DHBS 8mmol/ L.樣品與試劑比例是 1:100.37℃反應 2 分鐘即可完成反應.可以明顯看出是加大膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶等效應酶用量,從而使反應加速.目前要求這種快速反應的試劑用戶還不多,但它是一種發(fā)展趨勢.

（二）一步法試劑盒

這是隨著方法學的改進,特別是

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